Alexandra Althoff studierte Angewandte Theaterwissenschaft in Gießen, Dramaturgie in Leipzig und Film in Amsterdam. Als feste Dramaturgin war sie am Schauspiel Köln, am Schauspielhaus Bochum und am Schauspiel Frankfurt engagiert. Mit Bernhard Mikeska und Lothar Kittstein gründete sie 2009 das Kunstkollektiv RAUM+ZEIT; Theaterarbeiten entstanden u.a. im Auftrag vom Schauspiel Frankfurt, Residenztheater München, Kunstfest Weimar, Düsseldorfer Schauspielhaus und Berliner Ensemble. "Antigone :: Comeback" wurde 2019 zum Schweizer Theatertreffen eingeladen, "Berlau :: Königreich der Geister" mit dem Friedrich-Luft-Preis 2022 ausgezeichnet – die beiden Inszenierungen verbinden VR-Installation und Schauspiel. Von 2019 bis 2022 wirkte sie als Stellvertretende Künstlerische Direktorin am Burgtheater. Als Lehrbeauftragte unterrichtete sie u.a. am Thomas Bernhard Institut der Universität Mozarteum Salzburg, an der Kunstuniversität Graz sowie an der HfMDK Frankfurt am Main. 2023 wurde Alexandra Althoff zum Senior Artist am Max Reinhardt Seminar ernannt, das sie seit März 2024 leitet.